الف) مقدمه

آنزیم‌های DNA پلیمراز با صحت بالا ( High fidelity DNA polymerases) برای تکثیر توالی‌‍‌هایی که نیاز به تصحیح جهش در حین انبوه‍‍‌‍ سازی دارند،‍ حیاتی هستند. آنزیم DNA  پلیمراز فیو‌ژن یک آنزیم دارای عملکرد قوی و صحت بالایی می‌باشد که در تمامی کاربردهای PCR  می‌تواند مورد استفاده قرار گیرد. این آنزیم دارای یک ساختار خاص می‌باشد، یعنی به دلیل داشتن دٌمین اضافی سرعت و صحت را افزایش می‌دهد. این آنزیم برای تکثیر قطعات DNA در کلون­سازی ژن و قطعات طویل ایده‌آل می‌باشد. فیوژن با میزان خطای 50 برابرکمتر از  DNA پلیمراز Taq و 6 برابر کمتر از آنزیم DNA پلیمراز Pfu، یکی از آنزیم‌های دقیق در تکثیر ژن توسط PCR است.  این آنزیم دارای فعالیت پلیمرازی ´3 → ´5 و فعالیت اگزونوکلئازی ´5→´3 می‌باشد و تولید محصولاتی با انتهای صاف (blunt) می‌کند. به همراه آنزیم فیوژن یک بافر استاندارد 5X Phusion HF ، به علاوه یک بافر  5X Phusion GC ارسال می­شود که برای الگوهای پیچیده یا غنی از GC می‌توان مورد استفاده قرار داد. هر کدام از بافرها دارای MgCl₂ نیز می‌باشند. به علاوه، واکنش‌های PCR را می‌توان با استفاده از DMSO  و MgCl₂ که همراه آنزیم ارسال می‌شود، نیز بهینه سازی کرد.

ب) کاربردهای فیوژن

• کلونینگ
• PCR با صحت بالا
• تکثیر قطعات طولانی و سخت
• جهش زایی هدفدار
• تکثیر دقیق توالی‌های ژنی باکتری‌ها به منظور تعیین توالی

با کلیک بر روی دکمه مقابل می‌توانید دستور العمل‌های مربوط به این محصول را مطالعه کنید مشاهده دستور العمل‌ها