الف) مقدمه

Taq DNA لیگاز آنزیمی با وزن مولکولی KDa 74 است که تشکلیل پیوند فسفودی‌استر بین فسفات ´5 و هیدروکسیل ´3 دو الیگونوکلئوتید مجاور هم را به کمک NAD⁺  کاتالیز می‌کند. واکنش لیگاسیون تنها زمانی رخ می‌دهد که دو نوکلئوتید مجاور هم کاملا با بازهای روبرو مکمل باشد و همچنین بین آنها فاصله‌ای وجود نداشته باشد. آنزیم  Taq DNA لیگاز در دماهای بالا یعنی °C45-65 فعال است.

ب) منبع آنزیم

آنزیم حاضر یک آنزیم نوترکیب است که ژن آن مربوط به لیگاز Thermus aquaticus HB8  می‌باشد که در باکتری E.coli کلون، بیان و تخلیص شده است.

ج) کاربرد

1- تشخیص ژنی اختصاصی الل (Allele-specific gene detection) با استفاده از واکنش تشخیص لیگاز و واکنش زنجیره‌ای لیگاز

2- جهش‌زایی که توسط درج یک نوکلئوتید فسفریله شده در طول تکثیر PCR انجام می‌شود.

3- Gibson assembly

4- تعیین توالی نسل جدید(NGS)

5- Ligase detection reaction (LDR)

6- Repeat expansion detection (RED)

7- Ligase chain reaction (LCR) یا Ligation amplification reaction (LAR)

8- Oligonucleotide ligation assay (OLA)

9-synthesis  High fidelity gene

10- Simultaneous multiple site mutagenesis  

با کلیک بر روی دکمه مقابل می‌توانید دستور العمل‌های مربوط به این محصول را مطالعه کنید مشاهده دستور العمل‌ها