الف) مقدمه
سیستمهای زیستی دارای اجزای احیایی هستندکه در پیامرسانی سلولی، جابجایی ماکرومولکولی و تنظیم فیزیولوژیک نقش مهمی دارد. استرس اکسیداتیو به واسطه تغییر در فعالیت آنزیمها، گیرندهها، انتقال دهندهها، فاکتورهای رونویسی و ماکرومولکولها باعث از بین رفتن چرخه احیایی شده که پیامد آن عدم تعادل بین سیستم آنتی اکسیدانتی و پرواکسیدانتی میباشد. از آنجایی که بسیاری از پروتئینها دارای تیول آزاد حساس به سیستم احیایی هستند، تعیین و کمّی سازی حالت احیایی آنها سطح استرس اکسیداتیو نمونه را نشان میدهد.
کیت حاضر بر اساس معرف اِلمان (Ellman reagent) برای کمّیسازی تیولهای احیا کل در نمونههایی مثل پلاسما، سرم و بافتها و ... طراحی شده است. تیول کل شامل تیول مولکولهای کوچک مثل گلوتاتیون، سیستئین، هوموسیستئین و همچنین تیول موجود در سطح پروتئینهای محلول میباشد.
ب) اساس سنجش
مطابق با شکل زیر تیولهای آزاد موجود در محیط یا در سطح پروتئین با معرف اِلمان یعنی دیتیوبیسنیتروبنزوئیک اسید (DNTB) واکنش میدهد و تولید نیتروتیوبنزوات (TNB) میکند که رنگ آن زرد میباشد و در طول موج nm412 قابل کمّیسازی است. شدت رنگ نسبت مستقیم با تیولهای احیایی در نمونه دارد. حداقل تشخیص کیت حاضرMµ5/2 یا nmol/mg pr 5/2 تیول میباشد.
ج) محتویات کیت
نگهداری کیت: تمامی اجزا سازنده کیت را بجز استاندارد تیول (°C 20-) میتوان برای 6 ماه در یخچال نگهداری کرد.
با کلیک بر روی دکمه مقابل میتوانید دستور العملهای مربوط به این محصول را مطالعه کنید مشاهده دستور العملها